Estou trabalhando com luciferase que tem um comprimento de onda azul de 480 nm e quero poder tirar uma foto dela. O problema é que consigo ver a luciferase brilhando em toda a sua glória na minha frente, mas não importa o quanto tente, não posso tirar uma foto da luciferase com minha DSLR (Nikon D80) usando uma lente Nikon de 50 mm e uma lente Nikon 35 mm. Eu tentei remover os filtros (Nikon L37 e Hoya UV).
Estou curioso para saber se falta uma determinada lente / filtro ou se devo fotografar usando uma configuração de iluminação diferente. Eu já estou expondo para 30 "em f / 22 na ISO 1600. Talvez mais?
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bobthejoe
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Respostas:
Esse comprimento de onda está certamente dentro do espectro que você pode capturar com qualquer lente, com ou sem filtros. Os sensores digitais capturam entre 350-1000nm. Se estiver brilhando, convém que essa seja sua principal fonte de luz. Qualquer luz adicional que você lançar sobre ela diluirá o brilho do objeto e dificultará a visão.
Que abertura você está usando? A menos que isso seja incrivelmente escuro, não consigo imaginar 30 "não capturando algo, a menos que você esteja usando uma abertura muito pequena.
Você está fazendo isso em um quarto escuro com fundo escuro? O que você vê nas suas exposições de 30 "?
Por tentativa e erro, você pode executar uma variedade de velocidades do obturador (e ISO) para tentar obter um bom valor de exposição. Se conseguir vê-lo com os olhos, poderá fotografá-lo sem equipamento especial.
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Se houver outra luz presente, ela pode "lavar" facilmente a luminescência de baixo nível. Você não deve ter outra luz para começar.
Focalize com uma luz acesa. Use o foco manual ou, se sua câmera permitir, defina o foco manual, alterne temporariamente para AF, foque e depois volte para MF para focar a câmera.
Em seguida, desligue a iluminação para que a luciferase seja a única fonte de iluminação, exponha a partir daí e veja o que você obtém.
Se isso não funcionar, a exposição manual e a focagem manual permitem controlar o que a câmera faz e expor em uma variedade de exposições prováveis.
Eu apenas tentei fotografar meu mostrador de relógio de pulso luminoso não especialmente brilhante na escuridão total. A 250 mm e observe a cerca de 500 mm de distância, o relógio ocupou 1/3 da largura da exposição do quadro e foi de 6 segundos a f5,6 a 800 ISO. Os marcadores de horas individuais, que não são muito brilhantes para os olhos à luz da sala, brilham intensamente na foto quando são a única fonte de luz.
Assim. Focar "poderia ter sido muito melhor [tm] :-)
6S, f5.6, ISO800.
As principais perguntas são: você está usando outra iluminação e o que ESTÁ vendo em suas imagens.
Essas muitas imagens de Luciferase sugerem um nível de luz razoável e não parecem difíceis de fotografar.
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